|
Лекарственные препараты гуманизированных антителА. П. Белозоров Уникальная способность антител распознавать и связывать самые разнообразные молекулярные группировки — предпосылка широкого использования их в клинике. Терапевтическое применение антител началось в 1891 году, сразу же после того, как Беринг и Китазато показали, что сыворотка морских свинок, выживших после введения дифтерийного или столбнячного токсинов, приобретала способность защищать других животных от действия этих же токсинов. Четкие научные представления об антителах в это время еще только начинали формироваться.
Предупредить такие осложнения можно применяя антитела из сыворотки человека, и в настоящее время разработан целый ряд препаратов на основе антител из донорской крови. К сожалению, источник получения данных антител, как и спектр их специфичностей, очень ограничен. Для достаточно полной реализации терапевтического потенциала антител необходимо было обеспечить получение антител высокой специфичности против самых различных антигенов, в том числе антигенов тканей человека, значительно снизить вероятность побочных реакций на их применение и разработать технологии получения этих антител in vitro в достаточно больших количествах. За прошедшие 100 лет эти проблемы в основном удалось решить. Принципиальное значение для этого имела разработка технологии моноклональных антител. Антисыворотки, получаемые иммунизацией животных, содержат смесь антител различной специфичности, которые невозможно полностью унифицировать даже аффинной очисткой. Это значительно повышает вероятность нежелательных перекрестных реакций после введения таких антител. В то же время препараты моноклональных антител содержат совершенно одинаковые, идентичные по своей структуре и свойствам молекулы, специфичность которых может быть полностью охарактеризована. Серьезным препятствием для широкого применения антител являлась их чужеродность для организма-реципиента. После терапевтического введения антител в организме больного начинают вырабатываться антитела против введенных антител, при этом снижается эффективность вводимых антител и развиваются тяжелые аллергические реакции. Такие осложнения наблюдались при введении как нативных, так и моноклональных антител, имевших все антигенные характеристики мышиных антител.
Нужно было снизить чужеродность вводимых антител, гуманизировать их, сделать максимально похожими на антитела человека. Первоначально это удалось реализовать с помощью технологии химерных антител, искусственно сшивая антигенраспознающую часть мышиных моноклональных антител и кристаллический фрагмент антитела человека. Так как именно кристаллическая часть антитела несет основные видовые антигенные детерминанты, химерные антитела вызывают значительно меньше осложнений при длительном введении. Соединение разнородных фрагментов производят на уровне ДНК, кодирующей соответствующие части молекулы, затем экспрессируют ДНК в культуре клеток млекопитающих и отбирают наиболее активные клоны-продуценты.
Достаточно сложным и дорогостоящим является процесс наработки антител, которые синтезируются клетками искусственно созданного клона в ферментерах. Наиболее прогрессивная технология использует ферментеры с полыми волокнами, стенки которых образованы полупроницаемыми мембранами. По волокнам циркулирует культуральная среда, компоненты которой проникают через полупроницаемые мембраны в основной отсек, где находятся культивируемые клетки, в нем собираются синтезируемые антитела, которые не проходят через полупроницаемую мембрану. Важным преимуществом данного метода культивирования является сравнительно высокая концентрация конечного продукта. Цикл культивирования продолжается 3–9 месяцев; собранная за это время культуральная среда, содержащая образованные клетками антитела, подвергается очистке аффинной, ионообменной и гельпроникающей хроматографией, что позволяет выделить высокоочищенный препарат антител. В таблице приведены данные о наиболее важных препаратах моноклональных антител. Лидером терапевтического использования моноклональных антител является онкология. Разработан целый ряд моноклональных антител против различных опухолеассоциированных антигенов; показано, что некоторые из них обладают высокой терапевтической активностью и уже широко применяются в клинике, другие находятся еще на стадии лабораторного изучения. Применение моноклональных антител является в настоящее время широко используемой формой иммунотерапии рака. Она относится к пассивной иммунотерапии, так как использует синтезированные вне организма антитела и часто не требует активного участия иммунной системы больного, реактивность которой часто снижена. Механизмы действия моноклональных антител на клетки-мишени многообразны и не до конца изучены, они включают иммуноопосредованную (антитело- и комплемент-зависимую) цитотоксичность, стимуляцию фагоцитоза опухолевых клеток, блокаду рецепторов, способность непосредственно включать программу апоптоза, а также тормозить рост опухоли за счет блокады образования в ней новых сосудов . Одним из наиболее изученных противоопухолевых препаратов антител является Трастузумаб (Герцептин) — рекомбинантные моноклональные антитела, которые связываются с рецептором HER2 / neu на поверхности клеток многих солидных опухолей. Герцептин высокооэффективен при самостоятельном применении при запущенном раке молочной железы. Интенсивно изучается совместное применение Герцептина и химиотерапии при метастазах рака молочной железы. Установлено, что Герцептин не только обладает самостоятельной активностью, но и преодолевает резистентность опухоли, усиливая эффект химиотерапии. Так, например, при совместном применении Герцептин значительно повышает активность другого противоопухолевого препарата — Таксола. Герцептин обычно хорошо переносится больными, однако имеется опасность кардиотоксического действия, связанного с экспрессией HER2 на клетках миокарда. В настоящее время возрастает интерес к применению Герцептина при других типах опухолей, характеризующихся гиперэкспрессией HER2, — раке поджелудочной железы, раке мочевого пузыря, раке легкого, остеогенной саркоме и других. Ритуксимаб (Мабтера, Ритуксан) — препарат химерных моноклональных анти-CD20-антител, его механизм действия включает антительную и комплемент-опосредованную цитотоксичность, а также индукцию апоптоза. Препарат применяют при лейкозах низкой и высокой степени злокачественности с гиперэкспрессией СD20, особенно показан он в случае резистентности к химиотерапии. Имеются сообщения о положительных результатах применения препарата у больных с фолликуляр-ной лимфомой, лимфомой мантийной зоны, лимфоплазмоцитоидной лимфомой, макроглобулинемией Вальденстрема и мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомой. На лечение отвечают полной или частичной ремиссией до 48 % пациентов из группы резистентных к традиционной химиотерапии. Для повышения избирательности действия на опухоли антитела конъюгируют с токсинами или радиоактивными веществами, что обеспечивает доставку действующего вещества непосредственно к опухолевым клеткам. Моноклональные антитела, связанные с токсинами, часто называются иммунотоксинами, для их получения к антителам чаще всего присоединяют бактериальные (дифтерийный или псевдомональный) или растительные токсины (рицин А или сапорин). Показана эффективность применения иммунотоксинов для лечения некоторых опухолей, особенно лимфом. Разрешение на клиническое применение в США получили два типа радиоактивно меченных моноклональных антител — Ибритумомаб (Зевалин) и Тозитумомаб (Бексксар). Конъюгированные антитела могут оказывать более выраженный терапевтический эффект, чем неконъюгированные, но и осложнения при их применении наблюдаются несколько чаще, что зависит от характера связанного с ними соединения. В настоящее время продолжается уточнение показаний и схем применения конъюгированных моноклональных антител. Значительные перспективы имеет применение антител для терапии аутоиммунных и хронических воспалительных заболеваний, а также для предупреждения отторжения трансплантата. Раскрытие молекулярных основ иммунного распознавания, формирования активного иммунного ответа и толерантности, установление центральной роли в этих процессах Т-лимфоцитов позволяет направленно использовать целый ряд препаратов антител при таких заболеваниях, как ревматоидный артрит, псориаз, рассеянный склероз, сахарный диабет и другие. Для лечения аутоиммунных заболеваний применяется целый ряд гуманизированных антител, блокирующих различные механизмы иммунитета. Среди них антитела к рецепторам Т-лимфоцитов CD25, СD52 – тормозящие активацию лимфоцитов, CD4 – блокирующие функцию Т-лимфоцитов-хелперов и к CD18 – препятствующие миграции лейкоцитов в очаг воспаления. Высокой эффективностью при лечении ревматоидного артрита обладал Алемтузумаб (Кэмпас) — препарат антител к CD52 лимфоцитов, снижающий количество как Т, так и В-лимфоцитов в периферической крови. У большинства больных после применения препарата наблюдается стабилизация процесса или переход в ремиссию длительностью от нескольких недель до нескольких лет, однако при проведении повторных курсов препарата в некоторых случаях наблюдалось образование антиидиотипических антител. Целый ряд препаратов моноклональных антител (Эфализумаб, Алефацепт и др.) предложены для лечения тяжелых форм псориаза, характеризующегося развитием хронического воспаления кожных покровов и суставов. Эфализумаб — гуманизированное антитело против СD11а антигена, ингибирует взаимодействие LFA1 и молекулы межклеточной адгезии ICAM1, которое играет важную роль в активировании и миграции Т-лимфоцитов в очаг воспаления. Алефацепт представляет собой рекомбинантный белок, который состоит из внеклеточного фрагмента антигена LFA-3 человека, экспрессирующегося на поверхности антиген-презентирующих клеток и связанного с Fc-фрагментом иммуноглобулина человека. Алефацепт нарушает взаимодействие LFA3CD2, которое играет важную роль в активировании Т-лимфоцитов. Клинические испытания показали, что указанные препараты значительно улучшают состояние больных со среднетяжелой и тяжелой формами псориаза. К препаратам, обнаружившим высокую эффективность при лечении ревматоидного артрита, псориаза, анкилозирующего спондилита относятся блокаторы фактора некроза опухолей (ФНО) или его рецепторов. Один из первых препаратов этого ряда Инфликсимаб (Ремикейд) представляет собой химерное моноклональное антитело против ФНО, эффективен при лечении ревматоидного артрита, болезни Крона. Еще одним препаратом, активным при целом ряде аутоиммунных и воспалительных заболеваний, является Этанерцепт — комплекс рецептора ФНО и Fc-домена IgG1-антител человека. Данная химерная конструкция обладает очень высокой аффинностью к ФНО и способна блокировать действие данного цитокина in vivo.
Гуманизированные моноклональные антитела активно применяются при трансплантации костного мозга для удаления донорских Т-клеток и предупреждения реакции «трансплантат против хозяина». Наиболее эффективным оказалось добавление антител к костному мозгу непосредственно перед его введением. Хорошие результаты позволили применить такую же обработку при инъекции стволовых клеток в периферическую кровь — альтернативы трансплантации костного мозга.
Статистические данные свидетельствуют о том, что моноклональные гуманизированные антитела составляют значительную и быстро растущую часть общего рынка фармацевтических препаратов. Общая сумма продаж препаратов моноклональных антител в 2006 году в мире составила 20,6 млрд долларов. Лидером продаж 2006 года с общей суммой 4,7 млрд долларов является Ритуксан, занимающий шестую позицию по сумме продаж среди всех медицинских препаратов. Предполагается, что в ближайшем будущем объем его продаж достигнет 10 млрд долларов в связи с постоянно возрастающим потреблением больными раком и артритом. Ремикад в течение последних трех лет продается ежегодно на 1 млрд долларов. В 2006 году еще пять моноклональных антител характеризовались такими же показателями. Обзор данных по продажам и финансированию производства биотехнологических препаратов за последние три года свидетельствует о настоящем сдвиге парадигмы от классических фармацевтических препаратов к моноклональным антителам и сходным с ними биотехнологическим производным. Производством моноклональных антител в настоящее время занимаются около 200 биотехнологических компаний, реализующих сотни новых проектов стоимостью миллиарды долларов, реализация которых обещает намного перекрыть производимые затраты. Ежегодный рост продаж препаратов моноклональных антител составляет более 20 %, и доминирующее место в нем занимают пока химерные антитела. Основные сферы применения антител — онкология, артриты, иммунные и воспалительные процессы . К сожалению, широкое использование этих препаратов в Украине сдерживается их высокой стоимостью, только небольшая часть из них разрешена к клиническому использованию в нашей стране. Остается только надеяться, что по мере расширения производства будет достаточно быстро снижаться и цена наиболее востребованных препаратов моноклональных антител, что позволит применять их для лечения более широкого круга больных в Украине.
© Провизор 1998–2022
|
Грипп. Прививка от гриппа
Нужна ли вакцинация?
Как и чем лечить кашель?
Безрецептурные лекарства при сухом и влажном кашле Устойчивость микробов к антибиотикам →
Помогает ли одежда из шелка лечить экзему?
Что лучше развивает ребёнка — книжки с картинками или с текстом? О безопасности автокресел для детей в возрасте от 4 до 12 лет
Аллергический ринит
Забеременеть в 40 Лечение бесплодия. Обзор существующих вариантов Аденома простаты. Как и чем лечить ? |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|