Количественное определение суммы флавоноидов в листьях некоторых видов рода Rumex L.

Абу Захер Кхалед, Н. С. Журавлев
Национальная фармацевтическая академия Украины

Одной из основных задач современной фармакогнозии является поиск новых источников биологически активных веществ с целью создания высокоэффективных лекарственных средств. Определенный интерес представляют растения рода щавель, которые характеризуются богатым химическим составом, а потому широким спектром биологического действия.

Растения рода щавель (Rumex L.) широко распространены в мировой флоре. Около 150 видов этого рода встречается в тропических и субтропических странах [1]. В Евразии произрастает около 50 видов щавеля [2], из них 24 — в Украине [3]. На территории Палестины произрастает около 14 видов щавеля, химический состав и фармакологические свойства которых не изучены [1].

Щавели перспективны как источники средств слабительного, вяжущего, противовоспалительного, антисептического, кровоостанавливающего, желчегонного и мочегонного действия [2, 4, 5].

Поэтому в качестве объектов исследования нами были выбраны щавель пирамидальный (Rumex thyrsiflorus Fingerh) флоры Украины, щавель красивый (Rumex pulcher L.) и щавель зубчатый (Rumex dentatus L.) флоры Палестины.

В ходе предварительных исследований различных частей изучаемых видов рода щавель качественными реакциями и хроматографическими методами в тонком слое сорбента и на бумаге в различных системах растворителей было установлено наличие в них антрахинонов, флавоноидов, антоцианов, катехинов, оксикоричных кислот, дубильных веществ, макро- и микроэлементов [6, 7, 8]. При дальнейшем изучении были выделены и установлена структура 11 соединений, из которых 6 — производных антрахинона (хризофанол, фисцион, эмодин, алоэ-эмодин, глюкоэмодин, хризофанеин); 3 — флавоноида (рутин, гиперозид, кверцетин) и 2 оксикоричные кислоты (кофейная и хлорогеновая) [9, 10].

Нами ранее было проведено количественное определение суммы флавоноидов в листьях изучаемых видов щавеля спектрофотометрическим методом в пересчете на гиперозид [11].

Целью настоящей работы явилось определение количественного содержания суммы флавоноидов фотоколориметрическим методом в пересчете на рутин [12].

Материалы и методы

Исследованию подвергались листья щавеля пирамидального, заготовленные в мае 1999 года в Харьковской области, и листья щавеля красивого и щавеля зубчатого, заготовленные в марте 1999 г. в окрестностях г. Тулкарим (Палестина).

Сырье сушили на воздухе, измельчали, просеивали сквозь сито с диаметром отверстий 1 мм.

Методика

Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в колбу со шлифом вместимостью 150 мл, прибавляли 30 мл 70% спирта. Колбу присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Извлечение фильтровали через вату в мерную колбу вместимостью 100 мл. Вату помещали в колбу для экстрагирования и прибавляли 30 мл 70% спирта, повторяли экстракцию. После охлаждения экстракт фильтровали через вату в мерную колбу, объем доводили 70% спиртом до метки и перемешивали.

К 1 мл полученного извлечения добавляли 1 мл 2% спиртового раствора алюминия хлорида и 4 мл этанола.

Параллельно готовили раствор сравнения, состоящий из 1 мл извлечения, 1 капли разведенной уксусной кислоты и 5 мл этанола (готовили двойное количество раствора сравнения).

Через 20 минут измеряли оптическую плотность на фотоэлектроколориметре КФК-2 при длине волны 440 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Количество флавоноидов в 1 мл в мг находили по калибровочному графику и содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье (х) в процентах рассчитывали по формуле:

где

С — количество флавоноидов в пересчете на рутин в 1 мл исследуемого раствора, найденное по калибровочному графику, мг;
m — масса сырья в граммах;
W — потеря в массе при высушивании сырья, %.

Приготовление 2% раствора алюминия хлорида. 2 г алюминия хлорида (ГОСТ 3759-75 «х.ч.» или «ч.д.а.») растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в 50 мл 50% спирта, доводят объем раствора спиртом той же концентрации до метки и перемешивают.

Построение калибровочного графика. Около 0,1 г (точная навеска) ГСО рутина помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 70% спирте и доводят объем раствора 70% спиртом до метки. Из исходного раствора готовят ряд разведений с концентрацией рутина от 0,2 до 0,8 мг в 1 мл. Далее поступают согласно методике, приведенной выше. По результатам измерения оптической плотности растворов строят калибровочный график, откладывая на оси абсцисс концентрацию рутина в миллиграммах в 1 мл, на оси ординат — оптическую плотность раствора.

Результаты количественного определения флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье представлены в табл. 1.

Таблица 1

Содержание суммы флавоноидов в листьях изучаемых видов щавеля

Результаты и их обсуждение

Как видно из данных, приведенных в таблице 1, содержание флавоноидов в трех изучаемых видах щавеля находится в пределах 0,70–1,42%.

Наибольшее количество флавоноидов содержится в листьях щавеля пирамидального.

Выводы

Впервые определено количественное содержание флавоноидов в листьях щавеля красивого, щавеля зубчатого флоры Палестины и щавеля пирамидального флоры Украины фотоколориметрическим методом в пересчете на рутин. Найдено 0,70%, 1,30%, 1,42% суммы флавоноидов соответственно.

Литература

1. Michael Zoharg. Flora Palaestina the Israel Academy of Sciences and Humanities.— Jerusalem, 1966.— Part 1.— P. 51–69.
2. Ареалы лекарственных и родственных им растений СССР / Под ред. В. М. Шмидта. 2-е изд., испр.— Л., 1990.— 224 с.
3. Флора УССР.— К.: АН УССР, 1952.— Т. 4.— С. 233–257.
4. Максютина Н. П., Комиссаренко Н. Ф., Прокопенко А. П. и др. Растительные лекарственные средства // Под ред.
Н. П. Максютиной.— К.: Здоров’я, 1985.— 280 с.
5. Лавренова Г. В., Лавренов В. К. Энциклопедия лекарственных растений.— Т. 2.— Донецк: Донеччина, 1996.— 512 с.
6. Ковальов В. М., Журавльов М. С., Абу Захер Кхалед. Фармакогностическое изучение Rumex thyrsiflores // «Досягнення сучасної фармації та перспективи її розвитку у новому тисячолітті»: Матеріали V нац. з’їзду фармацевтів України.— Х., 1999.— С. 304–305.
7. Ковальов В. М., Журавльов М. С., Абу Захер Кхалед. Фармакогностическое изучение листьев растений рода щавель // «Вчені України — вітчизняній фармації»: Матеріали науково-практичної конференції.— Х.: Вид-во НФАУ, 2000.— С. 147–148.
8. Ковалев В. Н., Журавлев Н.С., Абу Захер Кхалед. Сравнительное фитохимическое изучение подземных органов растений рода щавель // «Научные направления в создании лекарственных средств в фармацевтическом секторе Украины»: Тез. докл. республ. научной конференции.— Х., 2000.— С. 110–111.
9. Журавльов М. С., Ковальов В. М., Абу Захер Кхалед. Антрахінони деяких видів роду щавель // Фізіологічно активні речовини.— 2000.— № 1 (29).— С. 79–81.
10. Абу Захер Кхалед, Ковальов В. М., Журавльов М. С. Флавоноли та оксикоричні кислоти деяких видів рослин роду щавель // Фізіологічно активні речовини.— 2000.— № 2 (30).— С. 101–103.
11. Журавльов М.С., Абу Захер Кхалед, Ковальов С. В. Вивчення біологічно активних речовин представників роду щавель // Вісник фармації.— 2000.— № 4 (24).— С. 14–17.
12. Мохаммад Санад Субех Абу-Дарвиш. Фармакогностическое изучение различных органов жостера слабительного и жостера двусемянного: Дис…канд. фарм. наук; 15.00.02.— Харьков, 2000.— С. 39–40.