В. В. Малый

Подтверждение аутентичности соединений, выделенных из отечественных растений с эллаговой кислотой

Украинская фармацевтическая академия

Эллаговая кислота (ЭК) является высокоактивным кровоостанавливающим, противоопухолевым, антимутагенным, антивирусным агентом растительного происхождения [1–5]. Поиск новых источников ЭК в свете актуальности ее биологической активности достаточно перспективен. Известно несколько способов выделения ЭК. Сотрудниками УкрФА разработан новый способ, в основу которого положен латентный гидролиз эллаготанинов в определенных условиях [6]. Проведенный нами анализ литературных данных позволил выбрать из растений флоры Украины доступные отечественные танинсодержащие виды.

Из листьев представителей семейств Betulaceae (Betula verrucosa Ehrh., Corylus avellana L.), Rosaceae (Pyrus communis L.). и побегов растений семейств: Betulaceae (Corylus avellana L.); Comaceae (Comus mas L.); Populaceae (Populus alba L.); Rosaceae (Cerasus vulgaris Mill., Malus domestica Borik., Pyrus communis L., Prunus domestica L., Prunus moldavica Kotov., Prunus spinosa L., Rubus idaeus L.); Salicaceae (Salix alba L.); Tiliaceae (Tilia cordata Mill.); Juglandaceae (Juglans regia L.) нами была выделена ЭК и показана возможность применения способа выделения ЭК, разработанного для конкретного вида сырья — соплодий ольхи, для получения ее из других видов высших растений, широко распространенных в культивируемом состоянии, к тому же из сырья, являющегося отходами при формировании кроны [7].

После этого встала задача идентификации выделенных соединений. Для этого был проведен следующий комплекс исследований. Выделенные из вышеперечисленных растительных объектов соединения с 1%-ным раствором железа (III) хлорида образуют серую окраску, с диазореактивом — серо-коричневую окраску, что позволяет отнести их к ароматическим фенольным веществам. Ацетоновые растворы изучаемых соединений дают положительную реакцию Гриссмайера-Рейхеля — на свободную ЭК (с нитритом натрия в уксуснокислой среде образуют красно-фиолетовую окраску) [8]. Данные соединения, также как и ЭК, разлагаются при 360°С. При их хроматографировании в сравнении с достоверным образцом ЭК на бумаге в системах н-бутанол—уксусная кислота— вода (4:1:2) [9] и метилэтилкетон—ацетон—муравьиная кислота—вода (80:4:2:12) [10] величины Rf находились в пределах 0,31–0,33 и 0,50–0,52 соответственно. Пятна изучаемых соединений на хроматограммах в фильтрованном УФ-свете имели нативную сине-фиолетовую окраску, которая после обработки парами аммиака изменялась в желтую, также, как и образца ЭК.

Эмпирически рассчитанное процентное содержание углерода и водорода в молекуле ЭК составляло 55,60% и 2,02% соответственно. Определение элементного состава исследуемых образцов выделенных соединений отличалось от рассчитанного на 0,02–0,08%. Молекулярные массы анализируемых веществ, определенные по методу Раста, колебались в пределах 300,8–303,1 (при эмпирически вычисленной 302,2).

Спектральные характеристики исследуемых веществ следующие. В УФ-области имеются максимумы поглощения при 256 и 366 нм. Прибавление ацетата натрия приводит к появлению плеча при 277 нм и незначительному гипсохромному сдвигу длинноволнового максимума. ИК-спектры имеют полосы поглощения при 3390 см-1 (ароматические гидроксигруппы), 1700 см-1 (карбонильная группа) и 1620–1450 см-1 (колебания ароматического кольца).

Полученные ацетильные производные выделенных веществ не давали депрессии температуры плавления с достоверным образцом тетраацетата ЭК [II].

Таким образом, сравнение физико-химических свойств выделенных соединений и достоверного образца ЭК, величин их Rf в нескольких системах растворителей, а также идентичность их УФ- и ИК-спектров, данные элементного анализа и определение молекулярной массы позволили охарактеризовать все выделенные соединения как ЭК.

Литература

1. Барабой В.А. Растительные фенолы и здоровье человека.— М.: Наука.— 1984.— 160 с.
2. Effects of interaction of tannins with CO-exiting substances. VI I .Inhibitory effects of tannins and related polyphenols on xanthine oxidase/Hatano Tsutomu et al.//Chem. And Pharm. Bull.— 1990.— Vol. 38.— № 5.— P. 1224–1229.
3. Ellagic acid content in small fruits, mayhaws and other plants/Wang Shiow Y., Moas John L., Payne Jerry A., galletta Gene J.//J. Small Fruit and Vitcult.— 1994.— Vol. 2.— № 4.— P. 39–49.
4. Identification of tricyclic analogs related to ellagic acid as potent selective tyrosine protein Kinase inhibitors/Pow Robert L., Chou Thomas Т., Bechle Bruce M., Goddard Colin, Larson Eric R.//J. Med. Chem.— Vol. 37.— № 14.— P. 2224–2231.
5. Tannin antioxydants from Osbeskia chinensis/Su Jeng-De, Osawa Toshihiko, Kawakishi Shunro, Namiki Mitsuo//Phytochemistry.— Vol. 27.— № 5.— P. 1315–1319.
6. Патент України 23109 A, A 61 К 35/78 Cnociб одержання елагової кислоти/О. П. Хворост, Л. В. Яковлева, А. Г. Сербін. Заявка № 95083763, пріоритет від 11.08.95. Опубл. 30.06.98.— Бюл. № 3.
7. Хворост О. П., Малый В. В., Сербин А. Г. Поиск новых растительных источников эллаговой кислоты. Фармаком.— 1998.— № 6.— С. 233–236.
8. Шмидт О. Природные дубильные вещества//Биохимические методы анализа растений.— М.: 1960.— С. 539–578.
9. Хайс И. М., Мацек К. Хроматография на бумаге.— М.: Изд-во иностр. лит.— 1962.— 851 с.
10. Rejo L. A method for the paper-chromatografic separation and identification of phenol derivatives, mould metabolites and related compounds of biochemical interest, using a “reference system”. J. Chromatogr.— 1958.— Vol. 1.— № 3.— P. 338–373.
11. Jurd L. Plant polyphenols. 1.: The Polyphenolic Constituents of the Pellicle of the Walnut (Juglans regia)//J. Am. Chem. Soc. — 1956.— Vol. 78.— № 14.— P. 3445–3448.