Н. Ю. Тумасьянц

О влиянии предварительной низкотемпературной обработки питательных сред на чувствительность S. aureus к антибиотикам

Донецкий государственный медицинский университет им. М. Горького

Работы многих исследователей посвящены изучению биологического действия свежеталой воды. Модельными лабораторными опытами [1] показано стимулирующее действие свежеталой воды на рост водорослей. Известны сообщения о стимулирующем действии свежеталой воды на рост и продуктивность почвенных бактерий [2], о бурном развитии гидрофильных микроорганизмов в условиях Арктики [3] и др.

Исследованиями ученых [4] установлен и изучен эффект стимуляции жизнеспособности, роста и размножения микроорганизмов различных родов и видов при выращивании их в предварительно замороженных и оттаявших жидких питательных средах.

В ряде работ [4, 5] показано, что использование размороженных жидких питательных сред для выращивания микроорганизмов приводит к повышению нарастания концентрации жизнеспособных клеток и биомассы у 71,4–100% штаммов грамположительных бактерий и плесневых грибов.

Суточные кривые роста этих бактерий в размороженных средах имеют S-образную форму с укорочением лаг-фазы и некоторыми изменениями продолжительности фазы экспоненциального роста. В диапазоне культур, дающих в размороженных средах повышение биомассы и жизнеспособных клеток, в экспоненциальной фазе роста авторами [4, 5] получено повышение скорости размножения, абсолютной и удельной скорости роста и снижение продолжительности генерации. Микроорганизмы при культивировании в размороженных средах сохраняют свои культуральные, морфологические, тинкториальные и биологические свойства. Работы цитируемых авторов свидетельствуют о высокой биологической активности свежеталой воды в отношении различных организмов.

Целью наших исследований явилось изучение влияния свежеталой воды, образующейся при размораживании питательных сред, на биологические свойства микробов. Определяли чувствительность к антибиотикам культур S. aureus, выделенных от больных лактационными маститами. Методом диффузии в агаре на среде АГВ с применением бумажных дисков определяли чувствительность выделенных микробных штаммов к 17 антибиотикам (бензилпенициллину, ампициллину, оксациллину, карбенициллину, офлоксацину, цефотаксиму, тетрациклину, канамицину, гентамицину, стрептомицину, эритромицину, олеандомицину, линкомицину, ристомицину, рифампицину, левомицетину, доксициклину). Штаммы S. aureus инкубировали в термостате при температуре 37°С в течение 3-х часов в подвергнутых предварительной низкотемпературной обработке (t = -20°С) питательных средах (сахарном бульоне). Исследования проводились в сравнительном варианте: суспензии суточных агаровых культур S. aureus в изотоническом растворе хлорида натрия, содержащие 105 клеток/мл по оптическому стандарту, в количестве 0,1мл инкубировались в размороженных (опытных) и обычных (контрольных) питательных средах.

Данные о диапазонах чувствительности, умеренной устойчивости и устойчивости S. aureus к антибиотикам представлены в таблице.

Примечание:

1. В числителе - количество штаммов, а в знаменателе - процент от общего числа штаммов;

2. Названия антибиотиков:
Р - бензилпенициллин, AM - ампициллин, ОХ - оксациллин, СВ - карбенициллин, ОФЛ - офлоксацин, СТХ - цефотаксим, ТЕ - тетрациклин, K - канамицин, GM - гентамицин, S - стрептомицин, ЭРИ - эритромицин, OL - олеандомицин, L - линкомицин, РИС - ристомицин, RA - рифампицин, С - левомицетин, ДОКС - доксициклин;

3. ОПС - опытные питательные среды;

4. КПС - контрольные питательные среды Точное совпадение рубрик «чувствительные», «умеренно устойчивые» и «устойчивые» штаммы S. aureus из ОПС и КПС было получено по 7 антибиотикам (41,2%): карбенициллину, офлоксацину, канамицину, стрептомицину, эритромицину, олеандомицину, ристомицину. Несовпадение на 1 категорию по сравнению с контролем рубрик отношения к антибиотикам в одном случае в сторону повышения в культурах S. aureus из ОПС было определено по 5 антибиотикам (29,4%): бензилпенициллину (5,6%), цефотаксиму (3,2%), гентамицину (3,3%), рифампицину (5,6%), левомицетину (5,6%). По 1 случаю понижения категории рубрики отношения к антибиотикам в культурах S. aureus из ОПС по сравнению с контролем было выявлено в отношении 3 антибиотиков (17,6%): ампициллина (3,4%), тетрациклина (3,2%), линкомицина (7,7%). По 2 случая несовпадения с контролем рубрик отношения к антибиотикам в культурах S. aureus из ОПС определено по 2 антибиотикам (11,8%): оксациллину (8,0% в сторону увеличения), доксицилину (7,7% в сторону уменьшения).

Векторность несовпадений была и в сторону увеличения, и в сторону снижения. Единичные случаи несовпадения рубрик встречались во всех группах исследованных антибиотиков, кроме макролидов. У антибиотиков группы пенициллинов они имели еще и разную направленность. Однако различия по диапазонам чувствительности, умеренной устойчивости и устойчивости в культурах S. aureus из ОПС и КПС были статистически недостоверными, случайными. Поэтому следует считать, что влияние свежеталой воды на чувствительность микроорганизмов к ряду антибиотиков настолько невелико, что получаем объективную характеристику чувствительности S. aureus к антибиотикам, соответствующую в основном результатам исследования в контрольных культурах.

Литература

1. Кисловский Л. Д. О стабилизации активных комплексов в додекаэдрических структурах воды// Структура и роль воды в живом организме.— Ленинград: Изд-во ЛГУ.— 1966.— Вып. 1.— С. 171–178.
2. Снеговая вода — стимулятор роста и продуктивности бактерий//Сельское хозяйство Сибири.— 1961.— № 7.— С. 66–69.
3. Лях С. П. Адаптация микроорганизмов к низким температурам.— М: Наука, 1976.— 160 с.
4. Подгорнова В. Г. Влияние предварительной низкотемпературной обработки жидких питательных сред на накопление биомассы, жизнеспособных клеток, скорость роста и размножения периодических культур: Автореф. дис... канд. мед. наук: Д 074. 22. 01/Моск. НИИ вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова.— М., 1981.— 19 с.
5. Ластков О. А. , Подгорнова В. Т. Влияние низкотемпературной обработки жидких питательных сред на размножение микроорганизмов//Прикладная биохимия и микробиология.— 1975.— Т. 11.— № 4.— С. 523–525.